Práctica 10: Determinación de clamidia en orina
Objetivo
Comprobar la presencia de la bacteria Chlamydia trachomatis en la orina de dos compañeras.
Fundamento
Es una prueba de
inmunoensayo de flujo lateral cualitativa en muestras cervicales femeninas y muestras uretrales o de orina
masculinas. En esta prueba el anticuerpo específico del antígeno de
Chlamydia está cubierto en la región de la banda de la prueba. Durante la
prueba, la solución extraída del antígeno reacciona con un anticuerpo a
Chlamydia que está recubierto con partículas. La mezcla migra hacia arriba
para reaccionar con el anticuerpo a Chlamydia en la membrana
Fuente: Cromatest. Linear Chemicals, S.L. Chlamydia Cassette. ISO: 9001. ISO: 13485. (https://www.linear.es/wp-content/uploads/2018/03/4240220-Chlamydia-cassette-20t-cas.pdf)
Materiales y reactivos
Kit de Chlamydia Cassette y 2 muestras de orina.
Procedimiento
1.- Sacar el kit de la nevera y atemperarlo.
2.- Mientras se atempera, en un tubo de 10mL añadimos 4mL de orina y 4mL de agua destilada.
*Incidencia: en realidad eran necesarios 10mL de orina y 10mL de agua destilada, pero como solo teníamos
tubos de 10mL, tuvimos que reducir las cantidades.
3.- Meter los tubos en la centrífuga a 3000 x g durante 15min.
4.- Retirar el sobrenadante.
5.- Añadir 4 gotas del reactivo A al pellet, homogeneizar y trasvasar al tubo pequeño que viene en el kit.
6.- Dejar reposar 2min.
7.- Añadir 4 gotas del reactivo B y agitar con vórtex.
*Incidencia: como no teníamos vórtex, tuvimos que agitar manualmente.
8.- Dejar reposar 1min.
9.- Depositar 3 gotas de la disolución realizada en el test.
10.- Esperar unos segundos y comprobar los resultados.
2.- Mientras se atempera, en un tubo de 10mL añadimos 4mL de orina y 4mL de agua destilada.
*Incidencia: en realidad eran necesarios 10mL de orina y 10mL de agua destilada, pero como solo teníamos
tubos de 10mL, tuvimos que reducir las cantidades.
3.- Meter los tubos en la centrífuga a 3000 x g durante 15min.
4.- Retirar el sobrenadante.
5.- Añadir 4 gotas del reactivo A al pellet, homogeneizar y trasvasar al tubo pequeño que viene en el kit.
6.- Dejar reposar 2min.
7.- Añadir 4 gotas del reactivo B y agitar con vórtex.
*Incidencia: como no teníamos vórtex, tuvimos que agitar manualmente.
8.- Dejar reposar 1min.
9.- Depositar 3 gotas de la disolución realizada en el test.
10.- Esperar unos segundos y comprobar los resultados.
Resultados
-Positivo: aparecen dos líneas coloreadas, una en la banda de región de control (C) y otra en la banda de la región de la prueba (T).
-Negativo: una línea coloreada aparece en la banda de control de la región (C). Ningún color aparece en la banda de la región de la prueba (T).
En nuestro caso, tanto como con la orina de Ana como con la orina de Pablo, los resultados fueron negativos.
Foto: Nora Tomé (resultado negativo)
Laboratorio de Microbiología Foto: Nora Tomé
Laboratorio de Microbiología
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